هدف: هدف از این مطالعه استفاده از داربست نانولوله کربنی ترکیب شده با پلی وینیل الکل/کیتوزان (CS/PVA/CNT) الکتروریسی شده به منظور تمایز عصبی سلول های بنیادی برای کاربردهای بالقوه مهندسی بافت عصبی بود.مواد و روش ها: به منظور القای تمایز عصبی، سلول های بنیادی کارسینومای جنینی P 19 روی داربست CS/PVA/CNT کشت داده شدند. جهت بررسی فنوتیپ عصبی از رنگ آمیزی کرزیل ویوله و برای ارزیابی بیان نشانگر ویژه عصبی بتاتوبولین از روش ایمنوفلورسنس استفاده شد.نتایج: شکل ظاهری عصبی سلول های متمایز شده به وسیله رنگ آمیزی کرزیل ویوله تایید شد. سلول های مذکور به نشانگر ویژه عصبی بتاتوبولین واکنش ایمنی دادند.نتیجه گیری: این بررسی استفاده بالقوه از ترکیب مهندسی بافت و درمان با سلول بنیادی را به منظور بهبود بیماری های زوال عصبی پیشنهاد می کند.

هدف: پژوهش حاضر به منظور بررسی اثر داربست کیتوسان/پلی وینیل الکل آمیخته با عصاره مغز نوزاد رت (NRBE) بر تمایز عصبی سلول های بنیادی کارسینومای جنینی P19 طراحی شد.مواد و روش ها: به منظور القای فنوتیپ عصبی، سلول های بنیادی کارسینومای جنینی رده P19 روی داربست کیتوسان/پلی وینیل الکل آمیخته با عصاره ی مغز نوزاد موش صحرایی کشت شدند. برای ارزیابی توان بقا، مهاجرت و تمایز سلول های کشت سه بعدی، این سلول ها به دستگاه عصبی مرکزی در حال تکوین جنین جوجه پیوند شدند. سرانجام سلول-های پیوندی با استفاده از رو ش های رنگ آمیزی اختصاصی و ایمنوفلورسانس ردیابی شدند.نتایج: رنگ آمیزی اختصاصی کرزیل ویوله، فنوتیپ عصبی سلول های پیوندی را تایید نمود. همچنین بیان پروتئین اختصاصی عصبی، سیناپتوفیزین با استفاده از فرآیند ایمنوفلورسانس نشان داده شد.نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که سلول های بنیادی کارسینومای جنینی P19 را می توان به عنوان منبع عظیمی از سلول های پرتوان در مطالعات پیوندی به منظور بررسی جنبه های سلولی و مولکولی تکوین و تمایز سلولی مورد استفاده قرار داد.

زمینه و هدف: درک عملکرد سلول های بتا در سطح مولکولی به احتمال زیاد توسعه تکنیک های تولید سلول های بتا را تسهیل می کند. این مطالعه با هدف بررسی بیان ژن هومئوباکس دئودنال 1 (pdx-1) در سلول های تمایز یافته طراحی و اجرا شد. روش بررسی: این مطالعه بنیادی-کاربردی بر روی تمایز سلول های بنیادی به سلول های انسولین ساز انجام گرفت. محیط ثانویه حاصل از کشت پانکراس نوزاد یک هفته ای موش برای تمایز سلول های P19 استفاده شد. اجسام شبه جنینی (EBs) با کشت معلق 24ساعته سلول های P19 تشکیل شدند. برای القای تمایز، غلظت های متفاوت محیط ثانویه (25%، 50%، 75% و 100%) به محیط کشت اضافه شد. جهت شناسایی سلول های تمایز یافته مشتق از EBs در شرایط آزمایشگاهی از رنگ آمیزی دیتیزون استفاده شد. تولید انسولین-پروانسولین و رسپتور بتای انسولین در این سلول ها به روش ایمنوفلورسنس تعیین و بیان ژن pdx-1 به وسیله واکنش زنجیره پلی مراز-رونویسی معکوس ارزیابی شد. داده ها با استفاده از آزمون های آماری آنالیز واریانس یک طرفه و دانکن تجزیه و تحلیل شدند. یافته ها: پس از هفت روز القا، دستجات سلولی تمایز یافته ظاهر شدند. اوج پاسخ گویی تمایزی مربوط به غلظت 50% از محیط ثانویه بود. بیان ژن pdx-1 در دستجات سلولی تمایز یافته مشاهده شد. بیان نشانگرهای انسولین-پروانسولین و رسپتور بتا در سلول های تمایز یافته به روش ایمنوفلورسنس اثبات شد. نتیجه گیری: محیط ثانویه پانکراس باعث تمایز سلول های P19 به سلول های انسولین ساز شد، لذا نتایج این مطالعه می تواند تولید سلول های بتا را از سلول های بنیادی تسهیل نماید.

هدف: در این مطالعه قابلیت عصاره مغز نوزاد رت برای القای تمایز عصبی در سلول های بنیادی کارسینومای جنینی P19 مورد بررسی قرار گرفت.مواد و روش ها:عصاره مغز نوزاد رت تحت شرایط استریل جمع آوری و غلظت پروتئین کل موجود در آن تعیین شد. سپس میزان زنده مانی سلول ها پس از تیمار با عصاره مغز به دست آمد. جهت تمایز، اجسام شبه جنینی حاصل از کشت معلق سلول ها به مدت هفت تا چهارده روز در معرض محیط کشت حاوی سه درصد سرم به همراه عصاره قرار گرفتند. برای ارزیابی تمایز عصبی از دو روش رنگ آمیزی اختصاصی و real-time PCR استفاده شد.نتایج: رنگ آمیزی کرزیل ویوله مورفولوژی عصبی سلول های تمایز یافته را محرز ساخت. بیان ژن های اختصاصی عصبی به وسیله real-time PCR تایید شد. عصاره مغز در حال تکوین که سرشار از عوامل نوروتروفیک است، توانست بیان ژن های سیناپتوفیزین (پروتئین غشای پیش سیناپسی) و نستین (فیلامنت حدواسط سلول های پیش ساز عصبی) را در این سلول ها القا نماید. همچنین بیان فاکتور رونویسی Nanog که از عوامل بسیار مهم در تنظیم میزان پرتوانی سلول های بنیادی و مرتبط با خودنوزایی این سلول هاست، تحت تاثیر عامل القایی عصاره مغز کاهش یافت.نتیجه گیری: نتایج این پژوهش نشان داد که عصاره مغز نوزاد رت می تواند باعث بروز فنوتیپ عصبی در سلول های بنیادی P19 شده و بیان ژن های اختصاصی عصبی را در این سلول ها القا نماید.این مطالعه پتانسیل استفاده از ترکیب عصاره مغز نوزاد رت و درمان با سلول بنیادی را برای بهبود نقایص بیماری های تخریب کننده عصبی پیشنهاد می کند.

با توجه به اهمیت سیستم هم کشتی در تمایز سلولهای بنیادی، هدف اصلی از این مطالعه بررسی تاثیر استرومای کبد جنین موش بر تمایز سلولهای کارسینومای جنینی (P19) است. روش بررسی: سلولهای P19 به طور مستقیم در محیط نیمه جامد دارای 10% سرم جنین گاو و در غیاب فاکتورهای اگزوژن تکثیر و تمایز یافته و بعد از مدت 8 الی 12 روز به اجسام شبه جنینی (EBs) تبدیل شدند، اجسام شبه جنینی از محیط نیمه جامد خارج و تریپسینه شدند و به شکل سلولهای منفرد و یا دوتایی در آمدند، سپس این سلولها بر روی لایه پشتیبان تهیه شده از سلولهای کبد جنین موش (روز سیزدهم حاملگی) هم کشتی (Co-culture) شدند. پس از گذشت 14 الی 18 روز کلنی های ایجاد شده بر روی لایه پشتیبان مورد بررسی و شمارش قرار گرفتند. جهت تشخیص سلولهای تشکیل دهنده کلنی ها از رنگ گیمسا و جهت تشخیص کلنی های اریتروییدی از رنگ بنزیدین استفاده شد. یافته ها: نتایج شمارش و همچنین رنگ آمیزی کلنی ها با رنگ بنزیدین نشان داد که 94% کلنی ها بنزیدین مثبت و 6% مابقی کلنی های بنزیدین منفی بودند و در رنگ آمیزی گیمسا مشخص شد که سلولهای تشکیل دهنده این کلنی هامیلوییدی و یا لنفوییدی بودند. نتیجه گیری: بنابراین سلولهای پشتیبان کبد جنینی توانایی القا تمایز سلولهای کارسینومای جنینی را به رده های خونساز به خصوص اریتروییدی را دارند و احتمالا می توان در آینده و با انجام تحقیقات بیشتر از این روش هم کشتی برای تمایز سلولهای بنیادی جهت درمان بیماری های خونی استفاده کرد.

زمینه: بررسی ابعاد اخلاقی بکارگیری سلول های بنیادی جنینی حاصل از همانندسازی درمانی، از آن جهت مهم است که در علم حقوق، اخلاق همواره یکی از منابع اصلی بوده و اصولا چالشی که موضع گیری اخلاق را در بررسی موضوع واداشته این است که آیا پژوهش و تحقیقات و در نهایت درمان با سلول های بنیادی جنینی حاصل شده از رویان، نقض و هتک هویت و شخصیت انسانی محسوب می شود یا خیر؟ لذا محوریت بحث بر زمان شکل گیری شخصیت انسانی است.روش: روش تحقیق بر پایه منابع کتابخانه ای موجود در قالب کتب، مجلات داخلی و خارجی و سایت های اینترنتی حاوی کدهای اخلاقی می باشد.یافته ها: در بررسی و تحلیل زمان تکوین شخصیت انسانی و حاکم نمودن پندهای اخلاقی به نظر می رسد رویکرد تکثرگرا، راه حلی مناسب در حل این معضل است، به این معنا که مجموعه ای از معیارهای تعیین کننده، می تواند روندی حیاتی در رویان شکل دهند و غیر مقطعی بودن این معیارها، پژوهشگران را در درک بهتر مطلب کمک می کند.نتیجه گیری: تنها روش برای جلوگیری از سوء استفاده های تحقیقاتی، ممنوعیت نیست، بلکه برنامه ریزی واقع گرایانه و شناخت خطاهای اخلاقی در کاربرد سلول های بنیادی است و دولت می تواند با حمایت مالی از بیماران نیازمند سلول در قالب بیمه های درمانی یا بسته های حمایتی، هزینه های مازاد را به نحوی مدیریت و از سویی تسهیلاتی برای دهندگان داوطلب گامت قرار داده و بر آن نظارت کند.

سلول های بنیادی جنینی اغلب از توده سلولی داخلی بلاستوسیست مشتق شده و دارای خصوصیت خودنوزایی (self-renewal) و توان تمایز به انواع سلول ها (pluripotent) هستند، به طوری که میتوانند مشتقات سه لایه زاینده جنینی را بسازند. در نتیجه این سلول ها ابزار ارزشمندی در مطالعات زیست شناسی تکوینی، طب پیوند، توسعه داروسازی، ناهنجاری شناسی و مطالعه عملکرد ژنها هستند. این مقاله به بیان ساده مفاهیم مطالعه سلول های بنیادی و کاربردهای بالقوه آنها می پردازد.

امروزه موضوع سلول بنیادی جنینی، علاوه بر متخصصان علوم زیستی و پزشکان، گروه های دیگر از جمله دانشمندان علم اخلاق، حقوق، سیاسیون و حتی دولت مردان را نیز درگیر کرده است. تولید و استفاده پژوهشی از این سلول های منحصر به فرد، با طیف وسیعی از مباحث اخلاقی و حقوقی همراه است. بدیهی است که قانونمند کردن تحقیقات سلول بنیادی جنینی به لحاظ ضمانت پیشگیری و رفع پیامدهای ناگوار احتمالی و ممانعت از استفاده ابزاری از رویان؛ حافظ شأن و جایگاه رویان است.روند کند قانونمند کردن فرایند استفاده از سلول های بنیادی در مقایسه با شتاب استفاده از این سلول ها در پزشکی؛ ایجاد یک شکاف قانونی خواهد کرد، که به واسطه آن کرامت و حق حیات انسان خدشه دار خواهد شد و جبران مضرات آن بسیار دشوار خواهد بود. لذا قبل از توسعه این تحقیقات، ضرورت قانونمندکردن آن اجتناب ناپذیر است.ایران جزو نخستین کشورهایی بود که به این فناوری دست یافته است، با وجود این؛ هنوز راهنمای اخلاقی مصوب و قوانین مدون مرتبط در کشورمان وجود ندارد و این در حالی است که سایر کشورهای پیشرو در این حوزه علمی، از همان سال های اول شروع این تحقیقات و حتی قبل از آن، فعالیت های قانون گذاری را با صرف وقت و دقت کارشناسانه آغاز کرده اند.این مقاله ضمن تبیین جوانب و پیامدهای این فناوری، سیری کوتاه بر وضعیت قانون گذاری در سطح مجامع بین المللی و چند کشور پیشرفته داشته و در نهایت ضمن عنایت به نکات کلیدی در این قوانین، ضرورت ساختارمند کردن این تحقیقات در ایران را با تدوین قوانین مرتبط؛ یادآور می شود.